它具有下列特點:
成分規(guī)格
Buffer GL |
15ml |
25ml |
50ml |
Buffer W1(concentrate) |
13ml |
26ml |
52ml |
Buffer W2(concentrate) |
15ml |
30ml |
60ml |
Buffer EBE(DNase/RNase-Free) |
10ml |
10ml |
30ml |
Proteinase K |
1ml |
2×1ml |
4×1ml |
Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
蛋白酶 K 于-20℃ ,其他組分室溫(15 - 25℃),可保存12 個月 |
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本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于其它用途 |
使用方法
自備試劑
無水乙醇。
(注 意:使用前請先在緩沖液 Buffer RW1 和 Buffer RW2 中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽)
1. 取 1.5 ml 離心管(自備),加入 20 μl 的 Proteinase K 溶液。
2. 向離心管中加入 200 μl 血清、血漿、病毒拭子保存液或病毒原液、無細胞體液等,再加入 200 μl Buffer GL,渦旋震蕩充分混勻。3. 56℃孵育 10 min,短暫離心,將管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 μl 無水乙醇,渦旋震蕩 15 sec,室溫放置 5 min,使溶液溫度降至室溫,短暫離心,將管壁上的溶液收集到管底。
(注 意:如果環(huán)境溫度超過 25℃,無水乙醇應(yīng)在冰上預(yù)冷后使用。)
5. 將一個吸附柱放入收集管中,將上一步所得溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12,000rpm離心 30 sec,棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl 的 Buffer RW1,室溫 12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。
(注 意:在 Buffer RW1 濃縮液中按要求加入無水乙醇,用后及時蓋緊,以防乙醇揮發(fā))
7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl 的 Buffer RW2,室溫 10,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。
(注 意: Buffer RW2 按要求加入無水乙醇,用后及時蓋緊,以防乙醇揮發(fā);如需進一步提高核酸純度,可重復(fù)步驟 7 一次。)
8. 室溫 12,000 rpm 離心 2 min,甩干殘留液體。
(注 意:此步不能省略,否則殘留乙醇會影響基因組 DNA/RNA的后續(xù)使用)
9. 將離心吸附柱置于一個干凈的離心管中,小心打開吸附柱的蓋子,室溫放置2min,使吸附膜完全變干。
10. 加入 30 - 100 μl Buffer RE 或 DEPC-ddH2O,室溫放置 2 min。12,000 rpm離心1min,離心管底溶液即病毒 DNA/RNA。
(注 意:為增加洗脫效率,可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置2 min,再次離心收集)
注意事項
