NAD蘋果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH在細(xì)胞多種生理活動中扮演著重要的角色,包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性,MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH, NADP-MDH主要存在于真核細(xì)胞中。
測定原理:
NADP-MDH催化NADPH還原草酰乙酸生成蘋果酸,導(dǎo)致340nm處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一、提取液60 mL×1瓶,在4℃保存;
試劑二、液體50 mL×1瓶,在4℃保存;
試劑三、粉劑×2支,-20℃保存;臨用前加入300μL蒸餾水;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四、粉劑×2支,-20℃保存;臨用前加入300μL蒸餾水;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
紫外分光光度計/酶標(biāo)-儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。