產(chǎn)品詳情
簡(jiǎn)單介紹:
Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)測(cè)試盒?ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法,其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
詳情介紹:
Fd-谷氨酸合成酶(Fd-GOGAT)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
GOGAT廣泛分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。GOGAT分為以NADH為還原劑的NADH-GOGAT和以鐵氧還蛋白為還原劑的Fd-GOGAT。Fd-GOGAT主要存在于葉綠體基質(zhì)中,與光合作用和光呼吸有關(guān),主要同化NO3-還原和光呼吸產(chǎn)生的NH4+。測(cè)定原理:
Fd-GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸,谷氨酸脫氫酶催化谷氨酸的脫氫反應(yīng),同時(shí)產(chǎn)生NADH,使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測(cè)定吸光值。
酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液提?。?
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。