產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
我司?磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)測試盒憑借其的標(biāo)曲、嚴(yán)格的質(zhì)控、較高的穩(wěn)定性，在世界范圍內(nèi)的科研試劑領(lǐng)域中脫穎而出，深受數(shù)十個國家上萬名使用者的青睞。
詳情介紹：
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)測試盒
測定方法: 微量法
測定規(guī)格: 100管/96樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注 意: 正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
PEPC(EC 4.1.1.31)廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸與二氧化碳反應(yīng)生成草酰乙酸呈不可逆反應(yīng)的酶,對三羧酸循環(huán)的運轉(zhuǎn)起重要。
測定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計算PEPC活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
1、或培養(yǎng)細胞:先收集或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
