產(chǎn)品詳情
簡單介紹：
過氧化氫酶(CAT)測(cè)試盒由上海通蔚商鋪專售，過氧化氫酶(CAT)活性試劑盒產(chǎn)品包括價(jià)格; 規(guī)格; 包裝; 說明書; 測(cè)定方法等生化試劑盒的詳細(xì)介紹，通蔚生物提供技術(shù)支持，免費(fèi)代測(cè)等科研服務(wù)。
詳情介紹：
過氧化氫酶(CAT)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 分光光度法
測(cè)定規(guī)格: 50管/48樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定注 意 :正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
測(cè)定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出CAT活性。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑組成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
工作液:60mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、細(xì)胞或組織樣品的制備:
培養(yǎng)細(xì)胞:先收集或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬或細(xì)胞加入1mL提取液),超聲波破碎或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至240nm處,蒸餾水調(diào)零。
2、測(cè)定前將CAT檢測(cè)工作液37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min。
3、在1mL石英比色皿中加入35μL樣本和1mL工作液,混勻,室溫下立即測(cè)定240nm下的初始吸光值A(chǔ)1和1min后的吸光值A(chǔ)2,計(jì)算ΔA=A1-A2
