elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)與檢查
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,對各項(xiàng)物品與實(shí)驗(yàn)狀態(tài)的檢查是必不可少的一項(xiàng)工作。洗滌時(shí)要注意查看水流是否一致,在洗滌程中若出現(xiàn)任何小問題,都應(yīng)將此塊板做出記號(hào),以便后期組裝入庫時(shí)淘汰……
(1)標(biāo)本受xi菌污染
因菌體中或許富含內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被xi菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可發(fā)生非特異性顯色而煩擾測定作用。
(2)標(biāo)本溶血
ELISA試劑盒由于各種人為要素致使的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞損壞溶解時(shí)釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為符號(hào)的ELISA測定中,會(huì)致使非特異性顯色,煩擾測定作用。為打敗上述煩擾作用,標(biāo)本搜集時(shí)有必要留心避免溶血。
(3)標(biāo)本保存不當(dāng)
ELISA試劑盒在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚構(gòu)成多聚體、AFP可構(gòu)成二聚體,在間接法ELISA測定中會(huì)致使本底過深、甚至形成假陽性;標(biāo)本放置時(shí)間過長,有時(shí)抗原或抗體免疫活性削弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為打敗上述煩擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮搜集;如不能當(dāng)即測定,5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)有些濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可劇烈振蕩。